羊抗鼠IgG2a,IgG
分类: 最上层  发布时间: 2018-03-20 18:42 

羊抗鼠IgG2a,IgG
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货号: Ov02-02-05
数量: 大量
抗体英文名: Goat anti-mouse IgG2a,IgG
是否单克隆:
宿主: 山羊
供应商: 佰泰科
抗原来源: 小鼠
规格: 1mg
多克隆抗体、液体、无菌状态,溶于0.01mol/L磷酸盐缓冲液中,PH7.4、含0.14mol/L氯化钠。未加防腐剂。
本品为亲和纯化级羊抗小鼠IgG2a抗体与小鼠IgG2a有特异性反应,效价测定(ELISA)>1:40万。与小鼠IgA、IgM、IgG1、IgG2b、IgG3、人IgG、兔IgG等类/亚型无交叉反应;可用于ELISA, IHC, Blot科学研究实验。
聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度>96%。
4℃可短期存放,-20℃分装可长期储存,避免反复冻融。

方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:

  1. 包被:用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
  2. 5%脱脂乳(SMP)或者BSA 37℃(或者RT封闭)封闭1小时。弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。

3. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
4. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
5. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
6. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
7. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔 中,置37℃孵育1小时,洗涤。
同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml, 37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。
其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

温馨提示:不可用于临床治疗。
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